CTNNB1GOF（The gain of function (GOF) CTNNB1 mutations，功能获得型CTNNB1突变）在肝细胞癌（HCC）中，已被证明与免疫排斥相关，导致HCC患者对抗PD1治疗产生主要耐药性。在这些病例中，抑制性肿瘤免疫微环境（TIME）特征是T细胞的排除、树突状细胞招募的缺乏和细胞因子谱的改变。

（数据来源doi: 10.1136/gutjnl-2023-331342）

2023年12月华中科技大学同济医学院同济医院张万广团队在BMJ子刊《Gut》发表了题为“Targeting MMP9 in CTNNB1 mutant hepatocellular

carcinoma restores CD8+ T cell-mediated antitumour immunity and improves anti-PD-1 efficacy”的研究论文，该研究揭示MMP9是CTNNB1GOF的一个很有潜力的治疗靶点，对于提高免疫激活和抗PD1疗效提供了一种有效的免疫治疗联合策略。武汉迈思生物承担了文章中MMP9阻断抗体的开发。

 （文章发表信息）

MMP9在CTNNB1GOF HCC中表达上调：

通过构建三种不同肝脏自发肿瘤HCC模型，对三组模型进行了RNA-seq，维恩图显示了3个上调基因（MMP9，PROCR，ZFP287），利用癌症基因组图谱（TCGA）数据集分析了免疫评分和基质评分，筛选的差异表达基因（DEGs）鉴定出5个基因（CXCL5、MMP9、PLAUR、CLEC5A、ITGB6），从而定位到MMP9基因。 

 MMP9抑制CD8+T细胞的活化和迁移：

通过分别消除CD4+T细胞、CD8+T细胞或巨噬细胞来鉴定MMP9调节的特定免疫细胞亚群，证实了抑制CD8+T细胞对于MMP9促进肿瘤进展是必不可少的；体外共培养研究显示CD8+T细胞的肿瘤细胞毒性在MMP9刺激下呈剂量依赖性减弱，揭示了MMP9对CD8+T细胞激活的影响。

阻断MMP9可改善CTNNB1GOF HCC的时间并增强抗PD1的疗效：

基于抗PD1的免疫治疗已广泛应用于HCC治疗和肿瘤浸润的CD8+T细胞已被报道为抗PD1治疗的生物标志物。通过引入了MMP-9-in-1（选择性靶向血氧蛋白(PEX)的特异性MMP9抑制剂），联合抗PD1治疗CTNNB1GOF HCC模型，与MMP-9-in1或抗PD1单药治疗相比，联合治疗产生了更显 著的肿瘤消退和生存期延长。

MMP9抑制CD8+ CXCR3+ T细胞在CTNNB1GOF HCC中的浸润：

研究人员通过单细胞RNA-seq进一步探索MMP9在重塑TIME中的机制：MMP9基因敲除主要影响CD8+ CXCR3+T细胞的浸润和功能 （CD8 + CXCR3 + T细胞特异性地富集G蛋白偶联趋化受体活性、调节T细胞活化、白细胞迁移和细胞粘附）。

MMP9通过蛋白水解SSH1从CD8+ T细胞中脱落来抑制CXCR3介导的GPCR细胞内信号传导：

蛋白质组学鉴定了MMP9刺激后CD8+ T细胞中26个下调蛋白，这些蛋白富含GTPase活性、GDP磷酸酶活性、胞质钙离子浓度的调节和细胞迁移：基因集合富集分析进一步证明了MMP9的刺激与多种膜转运过程有关，同时MMP9抑制CD8+T细胞中CXCR3介导的ERK和AKT磷酸化，此外，在MMP9刺激下，CD8+T细胞中促进定向细胞迁移和T细胞对抗原刺激反应的SSH1显著降低。

小结：

结合以上数据结果，研究人员开发了一种新的抗MMP9兔单抗，并评估了免疫治疗在临床前实践中的潜在治疗价值，联合PD1治疗产生了更明显的肝细胞癌肿瘤生长抑制和延长生存期，为靶向MMP9抗体药物治疗肝细胞癌铺垫了可能。