抗体开发服务相关
2023-08-25
来源:
Mabnus
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1、抗体开发需要了解哪些信息?

答:初步了解信息如以下几点,

(1)客户研究物种:具体种类,动物、植物、微生物;

(2)靶标抗原信息:是否是小分子、蛋白、抗体,是否有序列信息,根据提供序列进行技术分析;

(3)抗体什么应用:WB、IHC、IF、Elisa抗体对、Flow、IP,不同应用后期筛选工作量有差异,报价不同;

(4)报价:根据应用分析难度确定最终报价参考。

 

2、简述贵公司平台优势?

答:目前我们抗体开发平台采用最新单B细胞重组兔单抗开发平台,通量高:一次能提供20-100株克隆上清,抗体亲和力相对鼠源要高10-100倍,最终交付抗体基因序列和重组表达抗体。

抗体开发服务?

 

3、抗体最后交付几条序列?

答:一般是交付1-3条差异序列,如果需要更多的差异克隆序列,按照需求数量梯度收费。

 

4、重组抗体最终有多少?

答:最终重组抗体交付1mg,如果需要更多,可以按照1L的生产标准进行放大生产。

 

5、从抗原开发到抗体周期多久?

答:如下图所示,一般抗原制备需要5-6周,免疫8-9周,B细胞筛选3-4周,分子扩增载体构建3周,重组表达2周。总周期一般4.5个月。

抗体开发服务?

 

6、重组兔单抗开发宣传推文?

答:(1)兔单B细胞-中和抗体开发服务:https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=Mzk0OTI3NjUzMA==&mid=2247483887&idx=1&sn=8d96eddeabcf0e94013e6795efadcde8&chksm=c35b9bf2f42c12e48eb5fbbda726e754c256abe8b149113a2ad465b31fdcd7724d229c7da9ac&token=894394577&lang=zh_CN#rd

(2)兔单B细胞-抗独特型抗体开发服务:

https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=Mzk0OTI3NjUzMA==&mid=2247483964&idx=1&sn=b07d6ea2e139fa0a2e66a921390d20fd&chksm=c35b9821f42c11371f4c46c009b57b4935f0dfa17e3b1a8fbf32309afa124aa56c7e57c1f252&token=894394577&lang=zh_CN#rd

(3)兔单B细胞-蛋白修饰性抗体开发服务:

https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=Mzk0OTI3NjUzMA==&mid=2247483964&idx=1&sn=b07d6ea2e139fa0a2e66a921390d20fd&chksm=c35b9821f42c11371f4c46c009b57b4935f0dfa17e3b1a8fbf32309afa124aa56c7e57c1f252&token=894394577&lang=zh_CN#rd

(4)兔单B细胞-识别点突变抗体开发服务

https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=Mzk0OTI3NjUzMA==&mid=2247484020&idx=1&sn=7603419e0f19d945200eaa62e9a07bc6&chksm=c35b9869f42c117fd8b56414925aab0a21da6377c398431b6c99f389f73b53f0b7e93916b988&token=894394577&lang=zh_CN#rd

(5)抗体案例:一个兔单克隆中和抗体的诞生

https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=Mzk0OTI3NjUzMA==&mid=2247484100&idx=1&sn=e12b855d9ba3565f6f00146c2c529801&chksm=c35b98d9f42c11cff6a86bd31bc81353768af29bfb1b25b6eef5c431201c3cb0a8f296fd9bbc&token=894394577&lang=zh_CN#rd

 

7、兔单抗宣传单页?

答:详细查看>技术资源>资料下载。

 

8、抗体效价如何?

答:在兔子免疫截短我们会选择四免后血清效价达到1:128K稀释比效价的兔子进行后续B细胞筛选,如果兔子效价不够,我们会继续加免1-2针。后续筛选的B细胞培养上清会提供给老师针对自己的应用筛选验证,选择最佳克隆再进行分子克隆重组表达,一般最终获得的抗体效价都能满足老师后续的应用场景需要。

 

9、目前兔子免疫一个项目是几只兔子呀?B细胞来源是脾细胞还是PBMC?效价达到什么标准会进行B细胞富集筛选?

答:目前常规项目免疫两只兔子,如果抗原免疫原性很好,足够后期筛选足够的阳性B细胞;我们初筛的阳性B细胞包含脾细胞和PBMC;一般四免后兔子血清效价达到1:128k稀释比,就会处理兔子进行初步B细胞富集筛选。

 

10、在B细胞上清的ELISA筛选阶段是铺5块板吗?每个样品大概有多少体积?

答:是的,针对候选克隆需求不高的项目,我们一般铺5板足够获取阳性克隆;每个孔我们经过Elisa筛选鉴定后,对候选克隆可以提供100-150ul给客户额外进行鉴定。

 

11、目前迈思运行的项目在ELISA阶段和中和筛选阶段阳性率大概在什么范围呀?

答:项目类型不同差异比较大,一般5板Elisa初筛阳性率在15%-60%,后续中和筛选在Elisa候选克隆中占比3%-55%。


12、在筛选阶段,资料中提到不同的筛选手段,不同项目会有差异,如果有多个检测项,迈思是都自己做还是可以合作双方分工完成?

答:我们倾向双方分工检测筛选,这样能够保障项目中候选分子在满足客户应用平台上的成功率,和提升鉴定效率。

 

13、资料中有一个案例最后交付的是1个序列,正常情况下一个项目的交付标准是怎样的呀?

答:正常项目一般交付1-3个unique阳性克隆序列。

 

14、迈思是否有多肽类靶点的抗体发现经验,包括KLH偶联抗原进行免疫等;

答:目前多肽类项目和小分子类项目都有开发过,包括抗原的合成、设计、偶联等工作,一般这种项目候选克隆重复率较高,最终交付克隆数不会太多。

 

15、如果增加相应的筛选数量具体怎样收费?

答:具体我们需要先评估抗原情况。如果需要增加筛选数量我们按照梯度报价标准。


16、迈思在判断阳性克隆的时候标准是怎样定的呀?需要OD值大于多少或者S/N大于多少?

答:OD阳性判定依据阴性对照的5倍以上。

 

17、针对多肽类项目,重复率是指筛选出来的B细胞多样性较弱的意思吗?那阳性率是否也会低于其他形式的抗原呢?

答:因为多肽的表位有限,所以能识别的抗体可能大部分序列比较一致,多样性没有蛋白类抗原多。阳性率上不会有太大差别。

 

18、项目交付是以交付B细胞阳性上清为准的吗?

答:筛选过程会提供部分B细胞阳性上清给客户进行检测筛选,确定后的阳性克隆我们会继续分析克隆重组表达,然后再次验证重组抗体,最终合格后交付抗体克隆序列和重组抗体,基础档提供1-3个确认的抗体序列和重组抗体,如果需要增加交付数量按照需求量梯度报价。

 

19、项目B细胞培养上清能否直接用于阻断检测?

答:如果是常规Elisa阻断验证实验,单孔B细胞培养上清足够用于1-2轮检测用量。