相比人和鼠(左),兔的B细胞抗体序列(右)在V(D)J基因重排过程中优先利用一小部分V(通常是(D)和J)基因片段,虽然初始产生的抗体多样性较少, 但兔B细胞离开骨髓后,会迁移到肠道相关淋巴组织(GALT)中增殖,并继续通过体细胞高突变(SH)和胞苷脱氨酶 (AID) 介导的基因转换使V(D)J基因发生突变修复, 极大增加了抗体多样性和亲和力。因此兔单抗可以很容易地识别磷酸肽、糖类、半抗原和小分子。(右下图示兔阑尾(兔GALT的主要部位)的组织切片,正在增殖的B细胞染成绿色,未增殖的B细胞染成红色。)
(数据来源 Lanning DK, et al. Results Probl Cell Differ. 2015)
与小鼠相比,兔子的体型更大(实验用兔子体重平均在2.5kg,小鼠在25g左右),同时兔子脾脏大概是小鼠的50倍, 这有助于收集更多的免疫B细胞,和产生更多类型阳性抗体;另外大多数小鼠品系是近杂交系,通常引起较少的多样性免疫反应;兔具有更简单的IgG亚型类型(便于工程改造)和更稳定的IgG结构:小鼠IgG主要有5个亚类,然而兔没有IgG的亚类。此外,兔IgG-κ1占有所轻链90%, 其中κ可变区中C80和C171之间存在链内二硫键,使兔单抗更稳定。
(数据来源 Weber J, et al. Exp Mol Med. 2017)
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(单B细胞兔单抗平台)