HEK,也称为HEK293、HEK细胞,代表人胚肾细胞,是众所周知的最重要的哺乳动物瞬时生产瞬转细胞之一。这种细胞类型流行的主要原因之一是HEK细胞具有高转染效率,可用于高表达水平的稳定和瞬时转染。
(HEK转染荧光蛋白显微镜下图像)
HEK细胞的历史:
HEK细胞的历史可以追溯到1973年,当时荷兰莱顿大学的Alex Van Der Eb和他的团队培养了这种细胞,其中一位博士后Frank Graham通过腺病毒5进行了转染,细胞命名中的数字可以追溯到他的第293次实验产生的原始细胞克隆这一事实。由于存在Ad5 E1A/B基因,HEK293常用于生产腺病毒载体和腺相关病毒载体。同时由于其易维护和稳健性,快速生长的细胞系及其衍生物通常应用于生物技术,例如生物制药的重组抗体表达以及细胞生物学研究。
(数据来源 Hu J, et al. Cells Tissues Organs. 2018)
HEK细胞系列:
HEK293T:表达SV40T抗原基因,进而导致表达载体的扩增,最终增加感兴趣的基因表达。
HEK293F:是一种HEK野生型株,在无血清培养基中快速生长,具有高水平的蛋白表达。
HEK293E:表达EBNA1,EBNA1能够促进游离DNA的核转移,从而提高增强子活性促进蛋白产生。
HEK293S:293S细胞适合低Ca2+培养基悬浮生长和培养。随后,对293S细胞进行甲烷磺酸诱变和蓖麻毒素选择修饰,整合pcDNA6/TR质粒,产生293SG;然后用pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒对293SG细胞进行转化,生成293SGGD细胞,用于糖工程修饰蛋白表达。
HEK优势:
⭕ 快速倍增时间(约36小时);
⭕ 易于培养;
⭕ 可以作为增殖的粘附或悬浮液生长;
⭕ 高再现性和一般一致性;
⭕ 产生大量重组蛋白,尤其是那些在含有CMV启动子的质粒载体中的蛋白;
⭕ 瞬态和稳定的基因表达;
⭕ 通过使用物理和化学方法易于转染。
我们开发了专有的HEK细胞抗体表达平台,以满足制药、生物技术、诊断和学术界对重组抗体技术不断增长的需求。这种无血清哺乳动物瞬时表达系统为稳定细胞系生成提供了更快、更经济的替代方案,可在HEK细胞中快速产生高纯度和低内毒素水平的重组抗体。